20×试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按 1:20 稀释,即 1 份的20×洗涤 缓冲液加 19 份的蒸馏水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置 1min 后甩尽 孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板 5 次。
2. 自动洗板机:每孔注入洗液 350 μL,浸泡 1min,洗板 5 次。


1. 从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自 封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50 μ L;
3. 样本孔先加待测样本 10 μL,再加样本稀释液 40 μL;空白孔不 加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶 (HRP) 标记的检测抗体 100 μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅 或恒温箱温育 60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 1min,甩去 洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板 5 次 (也可用洗板机洗板) 。
6. 每孔加入底物 A、B 各 50 μL,37℃避光孵育 15min。
7. 每孔加入终止液 50 μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。
结果判断
绘制标准曲线:在 Excel 工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应 OD 值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样 本浓度值。

免责声明
1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所 产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者 承担。














试剂盒性能
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数 R 值,大于等于
0.9900。
2. 灵敏度:最低检测浓度小于 0.1 U/mL。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于 15%。
5. 贮藏:2-8℃ ,避光防潮保存。
6. 有效期:6 个月
洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按 1:20 稀释,即 1 份的20×洗涤 缓冲液加 272 份的蒸馏水。